Les bases de la Biologie Moléculaire

La biochimie des acides nucléiques

La structure des nucléotides

• Les bases azotées
• Les sucres
• Les groupements phosphate
• Le nucléotide
• ADN versus ARN

Les polynucléotides

L’ADN

• La double hélice
• La dénaturation et renaturation

L’ARN

L'organisation de l'ADN dans la cellule

Définition de la biologie moléculaire

Historique

• Les origines de l’ADN
• Vers la compréhension du rôle de l’ADN

Définition moléculaire du gène

La structure des génomes

Les chromosomes

Le fonctionnement du gêne

La réplication

• La réplication semi-conservative
• Les mécanismes moléculaires de la réplication
  • Les ADN polymérases
  • L’initiation de la réplication
  • L’élongation
  • La terminaison de la réplication

La transcription

• La structure des ARN
• Les différents ADN
• Principe de la transcription
  • L’unité de transcription
  • La transcription chez les procaryotes
  • La transcription chez les eucaryotes
• Comparaison procaryote/eucaryote

La traduction

• Les acides aminés
• Le code génétique
• Les ARN de transfert et les ribosomes
• La traduction chez les procaryotes
• La traduction chez les eucaryotes
• Les modifications post-traductionnelles

Le génie génétique

Les méthodes d’analyse des acides nucléiques

• L’extraction et la purification des acides nucléiques
• Le dosage et la séparation des acides nucléiquesB. Les outils enzymatiques

Les outils enzymatiques

• Les nucléases
• Les enzymes de modifications

L’analyse et la détection des acides nucléiques

• Les sondes moléculaires
• L’hybridation moléculaire
• Le séquençage de l’ADN

L’amplification des acides nucléiques

• Le clonage moléculaire
• La PCR et RT-PCR

Les applications aux biotechnologies

Production de protéines recombinantes

Introduction

• Définitions
• Les différentes applications
• Les différents systèmes
• Choix du système
• Les différentes étapes
• Les 1ères AMM
• Le marché français

Les bactéries

• Les promoteurs
• Les vecteurs
• La transformation
• Avantages et inconvénients

Les levures

• Saccaromyces cerevisiae : vecteurs, exemples
• Pichia pastoris : vecteurs, exemples
• La transformation
• Avantages et inconvénients

Les cellules eucaryotes

• Les vecteurs
• Différentes méthodes de transfection
• La transfection stable
• La transfection semie-stable
• Les cellules
• Les avantages et inconvénients

Les cellules d’insectes

• La stratégie du baculovirus
• Les cellules
• Les conditions de culture
• Les avantages et inconvénients

Les plantes

• Régénération à partir d’une cellule
• Les transferts de gènes
• Les avantages et inconvénients

Les animaux

• Le transfert de gènes
• Le choix du promoteur en fonction de l’animal
• Exemples

Les systèmes acellulaires, la purification et le contrôle qualité