Formation aux bases de la culture cellulaire

Réf : BMC-01

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Durée

3 journées – 21 heures
// De 9h00 à 17h00

Pédagogie

Effectif : 12 Personnes
QCM d’évaluation des compétences et échanges avec questions ouvertes
La formation sera sanctionnée par une attestation de formation

Moyens pédagogiques et techniques d’encadrement

Un vidéoprojecteur // Connexion WIFI haut-débit // Un support de cours numérique // Un paperboard

Accessibilité

Formation accessible au public à mobilité réduite – Adaptation des moyens de la prestation aux personnes en situation de handicap

Frais pédagogique

1600 € HT / Académiques : 1450 € HT
Déjeuners offerts

Formateur

Pr. D. Leguellec – Dr. U. Valcourt

Public concerné

Techniciens, ingénieurs, chercheurs et porteurs de projet toutes spécialités confondues – Débutants et intermédiaires

Prérequis

Aucun

Objectifs / Compétences

de la formation aux bases de la culture cellulaire

  • Savoir expliquer les caractéristiques fondamentales des cellules
  • Définir les caractéristiques propres des organismes vivants
  • Décrire la structure et la fonction des principaux organites intracellulaires
  • Savoir expliquer les propriétés fondamentales des membranes biologiques
  • Avoir connaissance des principes fondamentaux de la prolifération et de la mort cellulaire
  • Connaitre les différents systèmes cellulaires, leurs sources possibles et leurs spécificités
  • Acquérir les principes et les approches permettant la caractérisation, l’entretien, la propagation et la conservation des cellules
  • Différencier les systèmes cellulaires et comparer les différents modes de culture pour critiquer, différencier, identifier, et choisir le meilleur outil cellulaire et les conditions de culture appropriées en fonction des besoins (nature et durée) du travail expérimental
  • Définir, justifier et recommander un outil cellulaire et son mode de culture en fonction de l’application souhaitée ou des besoins expérimentaux
  • Différencier les grandes étapes méthodologiques pour mettre en œuvre son travail de culture cellulaire dans le bon respect des bonnes pratiques de laboratoire
  • Améliorer, concevoir et appliquer de nouveaux protocoles adaptés à ses projets
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Programme de la formation: Formation aux bases de la culture cellulaire

JOUR 1

Généralités

Théorie cellulaire

La cellule, une unité de vie

Les énoncés de la théorie cellulaire

Le monde vivant

Caractéristiques propres aux organismes pluricellulaires

Cohésion

Spécialisation

Conséquences de la spécialisation cellulaire

Structure de la cellule eucaryote

Membrane plasmique

  • Composition
  • Caractéristiques

Noyau

Cytosquelette

Reticulum endoplasmique

Appareil de Golgi

Mitochondrie

Conséquence de la compartimentalisation cellulaire

Propriétés des membranes

Endocytose

  • La perméation
  • La phagocytose
  • L’endocytose dépendante de la clathrine
  • L’endocytose dépendante de la cavéoline
  • Les voies d’endocytose

Adhérence cellulaire

  • Principes généraux
  • Les molécules d’adhérence
  • L’adhérence focale
  • Les jonctions d’adhérence

Communication cellulaire

  • Les différents types de communication
  • Les protéines G
  • Les récepteurs aux protéines G
  • Les voies de signalisation via les RCPG
  • La voie des facteurs de croissance

Prolifération, différenciation et mort cellulaire

Prolifération cellulaire

  • Le cycle cellulaire
  • L’appareil mitotique
  • La régulation du cycle cellulaire

Différenciation cellulaire

  • L’hématopoïèse
  • Vasculogenèse et angiogenèse

Mort cellulaire

  • Caractéristiques des cellules apoptotiques
  • Méthodes de mise en évidence des cellules apoptotiques
  • Apoptose et nécrose
  • Les caspases
  • Les voies de l’apoptose

JOURS 2 et 3

Introduction

Définition

Historique (acquisition des méthodes et évolution de la culture cellulaire)

Les modalités d’obtention des cellules

A partir de cellules en suspension

A partir d’explants entiers

A partir d’explants dissociés

  • Dissociation mécanique
  • Dissociation enzymatique
  • Dissociation chimique

Les systèmes cellulaires

Les cultures primaires

Les lignées cellulaires à durée de vie limitée – Notion de sénescence cellulaire

Les lignées cellulaires continues – Notions d’immortalisation et de transformation

Le choix d’une lignée cellulaire

La caractérisation des lignées cellulaires

Les hybridomes

Les cellules souches

Les banques de cellules

Les systèmes de culture

La culture d’organes

La culture d’explants

La culture organotypique

La culture de cellules

La culture de cellules en suspension

La culture de cellules adhérentes (avec ou sans matrice extracellulaire)

La culture en monocouche

La culture en trois-dimensions

La prolifération cellulaire et le passage

La courbe de croissance des cellules

Le comptage cellulaire

Le repiquage (ou passage) des cellules

Le temps de doublement

Les conditions de culture

Le pH

La température

L’osmolarité

L’oxygène

Les milieux de culture

Les solutions salines équilibrées

Les constituants du milieu de culture

Les antibiotiques

Le sérum

Les milieux définis sans sérum

Le renouvellement du milieu de culture

La conservation des cellules

La congélation

La décongélation

L’organisation des stocks cellulaires (« cell banking »)

Les bonnes pratiques de culture cellulaire

Les contaminations (dont mycoplasmes) et la prévention

L’environnement de culture (PSM et laboratoire de type L2)

Les bonnes pratiques de laboratoire

  • Gestes sous PSM
  • Aspects réglementaires

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    Dernière modification le 3 février 2023 à 12h40